CN103524573A - 对映贝壳杉烷型糖苷化合物及其制备方法和用途 - Google Patents
对映贝壳杉烷型糖苷化合物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103524573A CN103524573A CN201310491651.0A CN201310491651A CN103524573A CN 103524573 A CN103524573 A CN 103524573A CN 201310491651 A CN201310491651 A CN 201310491651A CN 103524573 A CN103524573 A CN 103524573A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- glycoside compounds
- type glycoside
- water
- extract
- elutriant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- RQIDFFQODQEVCU-VDFQZLMFSA-N CC(C[C@](C)(CCC1)O)C(CC2)[C@@H]1[C@](C)(CC1)C2[C@](C)(CO)C1=O Chemical compound CC(C[C@](C)(CCC1)O)C(CC2)[C@@H]1[C@](C)(CC1)C2[C@](C)(CO)C1=O RQIDFFQODQEVCU-VDFQZLMFSA-N 0.000 description 1
- XQYYXXCOAKJALV-UPYZFMFOSA-N C[C@](CO)([C@@H](CC1)[C@@](C)(CC2)[C@H](CC[C@@H]3I)[C@@]1(C)C[C@@]3(C)O)[C@H]2O Chemical compound C[C@](CO)([C@@H](CC1)[C@@](C)(CC2)[C@H](CC[C@@H]3I)[C@@]1(C)C[C@@]3(C)O)[C@H]2O XQYYXXCOAKJALV-UPYZFMFOSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,涉及从茅莓茎和叶中分离得到的两个新型对映贝壳杉烷型糖苷化合物,还涉及这两个化合物的提取分离方法,以及其在医药、保健方面的用途。
背景技术
茅莓Rubus parvifolius L.为蔷薇科悬钩子属落叶小灌木,生长于海拔400~2600米的山坡杂木林下、向阳山谷、路旁或荒野,广泛分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西、陕西、甘肃、山东、江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、河南、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州等地,野生资源十分丰富。其以根或茎、叶入药,药用名通常为薅田藨,功效主要包括散瘀止痛、解毒、杀虫等。现代研究表明,茅莓具有败毒抗癌、抗炎止痛、缺血保护、保肝、抗氧化等多种药理学效应。但到目前为止,有关茅莓活性化学成分的研究报道并不多。而且,既往研究中,研究者通常习惯于以茅莓的根作为研究原料,对茅莓茎和叶等地上部分的考察研究则少见报道。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的之一是对茅莓的茎和叶进行化学成分提取分离与药理活性研究,鉴定其具有药理活性的化学成分;目的之二在于提供所得活性化学成分的制备方法;目的之三在于提供所得活性化学成分在医药、保健方面的用途。
经研究,本发明提供如下技术方案:
1.对映贝壳杉烷型糖苷化合物,结构式如I或II所示:
2.所述对映贝壳杉烷型糖苷化合物的制备方法,包括以下步骤:
a.提取:将茅莓茎和叶干燥、粉碎,分成两份,其中一份用体积百分浓度为65%的乙醇作溶剂回流提取,收集提取液;另一份用体积百分浓度为65%的乙醇作溶剂进行渗漉,收集渗漉液;合并提取液和渗漉液,减压回收乙醇,制备得到流浸膏;
b.萃取:将步骤a所得流浸膏分散于水中,依次用石油醚、水饱和乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,收集正丁醇萃取液,浓缩,干燥,制备得到正丁醇萃取物;
c.分离:将步骤b所得正丁醇萃取物进行硅胶柱层析,以二氯甲烷、甲醇和水的混合液为洗脱剂按三者体积比为40:1:0至2:1:0.1进行梯度洗脱,收集洗脱液,薄层色谱法检查,合并相同组分的洗脱液,再分别进行反相C18柱层析,以甲醇和水的混合液为洗脱剂按二者体积比为5:95至80:20进行梯度洗脱,收集洗脱液,薄层色谱法检查,合并相同组分的洗脱液,分别浓缩、干燥,制备得到粗品;
d.纯化:将步骤c所得粗品分别用制备型高效液相色谱纯化或重结晶,即得结构式如I或II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物。
3.所述对映贝壳杉烷型糖苷化合物在制备抗炎药物中的用途。
4.所述对映贝壳杉烷型糖苷化合物在制备抗炎保健品中的用途。
本发明的有益效果在于:本发明从茅莓茎和叶的含水乙醇提取物中分离得到两个全新的对映贝壳杉烷型糖苷化合物。体外抗炎活性研究表明,这两个化合物对内毒素脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞的炎性因子TNF-α的表达具有明显的抑制作用。因此,这两个化合物可用于制备具有抗炎作用的药物或保健品。本发明不仅有助于探索中药茅莓防治疾病的机理及其物质基础,利于中药茅莓及其制剂的质量控制,而且有助于开发新的药物和保健品。在制备抗炎药物或抗炎保健品时,这两个化合物既可以单用、也可以联合应用作为活性成分;还能以这两个化合物为先导化合物,通过结构修饰或改造进一步提高其活性。此外,这两个化合物还可以作为化学合成中间体等,应用前景十分广阔。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚,本发明提供以下附图进行说明:
图1为结构式如I所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物的NOESY谱关键信息。
图2为结构式如II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物的NOESY谱关键信息。
图3为结构式分别如I和II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞释放炎性因子TNF-α的抑制作用,其中A为结构式如I所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物,B为结构式如II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物。
具体实施方式
下面将结合附图,对本发明的优选实施例进行详细的描述。优选实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件进行。
实施例1、对映贝壳杉烷型糖苷化合物的提取分离与鉴定
一、提取分离
a.提取:将茅莓茎和叶干燥、粉碎,平均分成两份,其中一份用体积百分浓度为65%的乙醇作溶剂,回流提取3次,每次加入相当于茅莓茎和叶总重量17倍的溶剂提取1小时,收集提取液;另一份用体积百分浓度为65%的乙醇作溶剂进行渗漉,收集渗漉液;合并提取液和渗漉液,减压回收乙醇,制备得到流浸膏;
b.萃取:将步骤a所得流浸膏分散于水中,依次用石油醚、水饱和乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,收集正丁醇萃取液,浓缩,干燥,制备得到正丁醇萃取物;
c.分离:将步骤b所得正丁醇萃取物进行硅胶柱层析,以二氯甲烷、甲醇和水的混合液为洗脱剂按三者体积比为40:1:0至2:1:0.1(分别为40:1:0、30:1:0、25:1:0、20:1:0、15:1:0、10:1:0.1、9:1:0.1、8:1:0.1、7:1:0.1、6:1:0.1、5:1:0.1、4:1:0.1、3:1:0.1、2:1:0.1)进行梯度洗脱,分段收集洗脱液,薄层色谱法检查,合并相同组分的洗脱液,最终将洗脱液分为14个洗脱部分;取第4洗脱部分进行反相C18柱层析,以甲醇和水的混合液为洗脱剂按二者体积比为5:95至80:20(分别为5:95、10:90、15:85、20:80、25:75、30:70、35:65、40:60、45:55、50:50、55:45、60:40、65:45、70:30、75:25、80:20)进行梯度洗脱,分段收集洗脱液,薄层色谱法检查,合并相同组分的洗脱液,最终将洗脱液分为A、B、C、D共4个洗脱部分;将A洗脱部分浓缩、干燥,制备得到化合物I粗品;将B洗脱部分浓缩、干燥,制备得到化合物II粗品;
d.纯化:将步骤c所得化合物I、化合物II粗品分别用制备型高效液相色谱纯化或甲醇水溶液重结晶,即得化合物I、化合物II纯品。
进一步研究发现,按照步骤c所述方法,将硅胶柱层析分离得到的其余13个洗脱部分分别进行反相C18柱层析,从第3、5、6、7洗脱部分中也能分离获得化合物I和化合物II。
二、结构鉴定
化合物I:白色结晶性粉末;正离子质谱ESI-MS+中显示两个典型的离子峰m/z:523.3[M+Na]+,1023.6[2M+Na]+;核磁共振碳谱(13C NMR)、核磁共振氢谱(1H NMR)数据及多键碳氢关系(HMBC)见表1(溶剂为氘代吡啶,600MHz);进一步结合NOESY结果(图1),得出化合物I的结构式如I所示,分子式为C26H44O9。经检索,该化合物尚未见报道,是一全新化合物。
表1化合物I的核磁共振波谱数据
化合物II:白色结晶性粉末;正离子质谱ESI-MS+中显示两个典型的离子峰m/z:521.3[M+Na]+,1019.6[2M+Na]+;13C NMR、1H NMR数据及HMBC见表2(溶剂为氘代吡啶,600MHz);进一步结合NOESY结果(图2),得出化合物II的结构式如II所示,分子式为C26H42O9。经检索,该化合物尚未见报道,是一全新化合物。
表2化合物II的核磁共振波谱数据
实施例2、对映贝壳杉烷型糖苷化合物的抗炎活性研究
收集对数生长期的小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,以1×105个/mL的浓度接种于96孔细胞培养板,分为四个实验组:单纯内毒素脂多糖(LPS)刺激组、低浓度化合物处理组(20μg/mL)、高浓度化合物处理组(50μg/mL)和空白对照组,每组设置三个复孔。待细胞贴壁后,低浓度和高浓度化合物处理组分别加入对应浓度的结构式如I或II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物,孵育2h,然后,单纯内毒素LPS刺激组、低浓度和高浓度化合物处理组分别加入终浓度为10pg/mL的LPS,37℃培养24h,最后,采用Rat TNF-αELISA检测试剂盒(欣博盛生物科技有限公司)测定各组TNF-α含量。
结果见图3,可见结构式分别如I和II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞的炎症因子TNF-α的产生均具有明显的抑制作用。因此,结构式分别如I和II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物可以用于制备具有抗炎作用的药物或保健品。在制备抗炎药物或抗炎保健品时,这两个化合物既可以单用、也可以联合应用作为活性成分,可以按照药物或保健品的常规制备方法制成适合临床治疗应用或人们日常服用的各种剂型。以这两个化合物为先导化合物,还可以通过结构修饰或改造进一步提高其活性。
此外,结构式分别如I和II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物还可以作为化学合成中间体等应用。
最后说明的是,以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述,但本领域技术人员应当理解,可以在形式上和细节上对其作出诸多改变,而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。
Claims (4)
1.对映贝壳杉烷型糖苷化合物,其特征在于,结构式如I或II所示:
2.权利要求1所述对映贝壳杉烷型糖苷化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.提取:将茅莓茎和叶干燥、粉碎,分成两份,其中一份用体积百分浓度为65%的乙醇作溶剂回流提取,收集提取液;另一份用体积百分浓度为65%的乙醇作溶剂进行渗漉,收集渗漉液;合并提取液和渗漉液,减压回收乙醇,制备得到流浸膏;
b.萃取:将步骤a所得流浸膏分散于水中,依次用石油醚、水饱和乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,收集正丁醇萃取液,浓缩,干燥,制备得到正丁醇萃取物;
c.分离:将步骤b所得正丁醇萃取物进行硅胶柱层析,以二氯甲烷、甲醇和水的混合液为洗脱剂按三者体积比为40:1:0至2:1:0.1进行梯度洗脱,收集洗脱液,薄层色谱法检查,合并相同组分的洗脱液,再分别进行反相C18柱层析,以甲醇和水的混合液为洗脱剂按二者体积比为5:95至80:20进行梯度洗脱,收集洗脱液,薄层色谱法检查,合并相同组分的洗脱液,分别浓缩、干燥,制备得到粗品;
d.纯化:将步骤c所得粗品分别用制备型高效液相色谱纯化或重结晶,即得结构式如I或II所示的对映贝壳杉烷型糖苷化合物。
3.权利要求1所述对映贝壳杉烷型糖苷化合物在制备抗炎药物中的用途。
4.权利要求1所述对映贝壳杉烷型糖苷化合物在制备抗炎保健品中的用途。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310491651.0A CN103524573B (zh) | 2013-10-18 | 2013-10-18 | 对映贝壳杉烷型糖苷化合物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310491651.0A CN103524573B (zh) | 2013-10-18 | 2013-10-18 | 对映贝壳杉烷型糖苷化合物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103524573A true CN103524573A (zh) | 2014-01-22 |
CN103524573B CN103524573B (zh) | 2016-04-13 |
Family
ID=49926968
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310491651.0A Expired - Fee Related CN103524573B (zh) | 2013-10-18 | 2013-10-18 | 对映贝壳杉烷型糖苷化合物及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103524573B (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106008154A (zh) * | 2015-01-22 | 2016-10-12 | 浙江大学宁波理工学院 | 一种贝壳杉烷天然产物对映贝壳杉烷-16α,17,19-三醇的制备方法 |
CN111166731A (zh) * | 2020-01-14 | 2020-05-19 | 延边大学 | 来源于粘委陵菜的贝壳杉烷型二萜类化合物在抑制脂肪蓄积中的应用 |
CN111777692A (zh) * | 2020-08-17 | 2020-10-16 | 南京赛尔健生物技术有限公司 | 一种茅莓分级多糖、制备方法和在抗抑郁中的应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110033525A1 (en) * | 2008-04-11 | 2011-02-10 | Zhijun Liu | Diterpene Glycosides as Natural Solubilizers |
CN102626451A (zh) * | 2012-05-08 | 2012-08-08 | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 | 茅莓总皂苷在制备抗疲劳药物中的应用 |
-
2013
- 2013-10-18 CN CN201310491651.0A patent/CN103524573B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110033525A1 (en) * | 2008-04-11 | 2011-02-10 | Zhijun Liu | Diterpene Glycosides as Natural Solubilizers |
CN102626451A (zh) * | 2012-05-08 | 2012-08-08 | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 | 茅莓总皂苷在制备抗疲劳药物中的应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
DONG-HUI HE ET AL.: "Tricalysiosides H–O: Ent-kaurane glucosides from the leaves of Tricalysia dubia", 《PHYTOCHEMISTRY》, vol. 66, 3 November 2005 (2005-11-03), pages 2857 - 2864 * |
HIDEAKI OTSUKA ET AL.: "Tricalysiosides P—U: Ent-kaurane Glucosides and a Labdane Glucoside from Leaves of Tricalysia dubia OHWI", 《CHEM. PHARM. BULL.》, vol. 55, no. 11, 30 November 2007 (2007-11-30), pages 1600 - 1605 * |
张敏 等: "山莓中两个新二萜的分离与鉴定", 《药学学报》, vol. 42, no. 11, 31 December 2007 (2007-12-31), pages 1155 - 1158 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106008154A (zh) * | 2015-01-22 | 2016-10-12 | 浙江大学宁波理工学院 | 一种贝壳杉烷天然产物对映贝壳杉烷-16α,17,19-三醇的制备方法 |
CN111166731A (zh) * | 2020-01-14 | 2020-05-19 | 延边大学 | 来源于粘委陵菜的贝壳杉烷型二萜类化合物在抑制脂肪蓄积中的应用 |
CN111777692A (zh) * | 2020-08-17 | 2020-10-16 | 南京赛尔健生物技术有限公司 | 一种茅莓分级多糖、制备方法和在抗抑郁中的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103524573B (zh) | 2016-04-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105130796A (zh) | 一种二萜类化合物及其制备方法与应用 | |
CN102940687B (zh) | 一种川楝子提取物及其用途 | |
CN107021947A (zh) | 金钗石斛中一个新化合物及其提取分离方法 | |
CN103524573B (zh) | 对映贝壳杉烷型糖苷化合物及其制备方法和用途 | |
CN103665079B (zh) | 一种茯苓酸单体的分离纯化方法 | |
CN103304618B (zh) | 具有抗炎活性的三萜皂苷类化合物、制备方法及其应用 | |
CN104840525A (zh) | 互叶白千层总黄酮的制备及其检测方法 | |
CN103012537B (zh) | 达玛烷型三萜类化合物及其制备方法和应用 | |
CN106317156B (zh) | 一种五羟基二酮类葫芦烷型三萜及其制法和用途 | |
CN103880620B (zh) | 一种倍半萜及其制备方法和用途 | |
CN102895303A (zh) | 一种提取分离青钱柳总黄酮的树脂纯化方法 | |
CN102895438B (zh) | 石菖蒲提取物制备治疗老年痴呆症药物的用途 | |
CN103087070B (zh) | 高纯度氯化两面针碱的制备及其质量控制方法 | |
CN105418722B (zh) | 一种名为油茶皂苷c4和c5的五环三萜类化合物的制备方法 | |
CN106317157B (zh) | 一种多羟基双酮类葫芦烷型三萜及其制法和用途 | |
CN104478983B (zh) | 从灵芝中提取分离的两种药用化合物及其方法和用途 | |
CN102731398A (zh) | 一种具有抗癌活性异紫堇二酮的制备方法 | |
CN109456163B (zh) | 一种具有对称结构的环烯酮类化合物及其制备方法和应用 | |
CN102863381A (zh) | 一种从长柄石杉中提取石杉碱甲的新方法 | |
CN101481370A (zh) | 一种广藿香酮的制备方法 | |
CN1278679C (zh) | 阿魏酸松柏酯在制备抗癌药物中的应用 | |
CN115010589B (zh) | 神香草提取物中大苞松香烷二萜类成分及其制备方法和应用 | |
CN104825577A (zh) | 一种利用木瓜皮渣联产齐墩果酸、熊果酸、总黄酮的方法 | |
CN102603754A (zh) | 一种两面针喹诺酮类生物碱的制备及应用 | |
CN116478029B (zh) | 木麻黄醇e及其制备方法和在抗炎药物中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160413 Termination date: 20161018 |